2D-PAGE und Bestimmung der Isoelektrischen Punkte

Abb. 85 2D-PAGE des IEP-Markers Das Bild zeigt die Verteilung des IEP-Markers auf einem 12,5% Gel. Am rechten Rand des Gels wurde zur besseren Orientierung der Molekulargewichtsmarker SDS-6-H aufgetragen.

Die Proteinspots wurden wie folgt zugeordnet:

  • 1 Cytochrom C (MW 12,3 kDa; IEP pH 10,65)
  • 2 Ribonuclease A (MW 13,7 kDa; IEP pH 9,45)
  • 3, 4 und 5 sind Lectine (MW 49 kDa; IEPs bei pH 8,3; 8,0 und 7,75)
  • 6 und 7 sind Myoglobin (MW 17,0 kDa; IEPs bei pH 7,35 und 6,9)
  • 8 Carboanhydrase (MW 29 kDa; IEP pH 6)
  • 9 und 10 sind b-Lactoglobuline (MW 18,4 kDa; IEPs bei pH 5,3 und pH 5,15)
  • 11 Trypsin Inhibitor (MW 20,1 kDa; IEP pH 4,5)
  • 12 Glucoseoxidase (MW unbekannt; IEP bei pH 4,2)
  • 13 Amyloglucosidase (MW 70 bis 89 kDa; IEP 3,5).

 

Abb. 86 2D-PAGE eines Gemischs aus IEP-Marker und Reticulomyxa Der gleicher IEP-Marker wie in Abb. 85 wurde mit extrahierten Reticulomyxa-Zellen gemischt und der 2D-PAGE unterworfen. Markante Proteine des Reticulomyxa-Zellextrakts, die sich gut einem isoelektrischen Punkt zuordnen lassen, werden lokalisiert. (12,5% Gel. Am rechten Rand des Gels wurde zur besseren Orientierung Molekulargewichtsmarker aufgetragen.)

 

Abb. 87 2D-PAGE eines Reticulomyxa-Zellextraktes Anhand der in Abb. 86 gefundenen markanten Proteine kann auch ohne Zusatz von IEP-Markerproteinen der isoelektrische Punkt eines beliebigen Proteinspots in der zweidimensionalen SDS-PAGE abgeschätzt werden. Die eingezeichneten Linien stellen die wiedergefundenen markanten Proteine dar. Die zugehörigen IEPs entsprechen denen in Abb. 85. (12,5% Gel. Am rechten Rand des Gels wurde zur besseren Orientierung Molekulargewichtsmarker aufgetragen.)

Tafel15
Diese Webseite nutzt Cookies. Einige von ihnen sind wichtig für den Betrieb der Seite, andere helfen, diese Website und die Nutzererfahrung zu verbessern. Sie können entscheiden, ob Sie die Cookies zulassen möchten. Bitte beachten Sie, dass bei einer Ablehnung womöglich nicht mehr alle Funktionalitäten der Seite zur Verfügung stehen.